什么是荧光标记？什么是荧光标记多肽？

本文摘要：一、荧光标记是什么?荧光标志所依赖的化合物称为荧光材料。荧光材料是指在紫外或蓝色和紫色光的照射下，通过共轭双键系统的化学结构，在激发状态恢复基底状态时发出荧光，从而激发状态。荧光标志技术是指利用荧光材···

　　一、荧光标记是什么?

　　荧光标志所依赖的化合物称为荧光材料。荧光材料是指在紫外或蓝色和紫色光的照射下，通过共轭双键系统的化学结构，在激发状态恢复基底状态时发出荧光，从而激发状态。荧光标志技术是指利用荧光材料的共价结合或物理吸附来提供研究对象的信息，这些信息可以在需要研究的分子的一个基团上进行研究。荧光标志的优点是没有放射性污染，操作简单，这使得荧光标志在许多研究领域的应用越来越广泛。

　　二、荧光标记的作用。

　　荧光标记物质也广泛应用于蛋白质功能研究和药物筛选等领域。人们使用荧光标记的多肽来检测目标蛋白质的活性，并应用高通量活性筛选方法进行药物筛选和药物**(如各种激酶、磷酸酶、肽酶等)。因此，多肽的荧光修饰也是多肽合成领域的一个重要组成部分。

　　三、位点荧光标记

　　通常在多肽的N端和异硫氰酸荧光素的N端直接连接氨基乙酸或β-丙氨酸，或在C端与赖氨酸(或半胱氨酸)的侧链连接，或在其他可连接的位置连接，可直接与多肽的N端和异硫氰酸荧光素的N端连接。

　　四、荧光标记举例

　　FITC修饰

　　异硫氰酸酯荧光素(FITC)具有较高的活性。一般来说，这种荧光基团在固相合成的过程中比其他荧光基团更容易引入，在反应过程中无需添加活化试剂。

　　一般有两种形式的FITC修饰多肽：

　　(1)在全肽链N端进到FITC，而且在FITC以前进到一分子的A子Acp(6-氨基己酸)，也称为烷基间隔。在反应过程中，FITC与肽链上裸露的-NH2反应，Acp的访问提供了六个碳直链空间，大大降低了反应的空间位置阻力，提高了反应效率，降低了反应难度。其次，FITC还与多肽结构中的-SH、侧链-NH2发生反应，Acp的添加也减少了这种副反应的可能性。此外，当多肽在酸性环境下切割时，需要通过环化作用在N端连接到FITC的多肽才能形成荧光素。这一过程通常伴随着*后一个氨基酸切除术，烷基间隔器Acp的访问避免了这种情况。

　　(2)整个肽中的一个Lys侧链与FITC相连。Lys侧链是四碳直链烷基，末端为-NH2，直接起到降低空间位置阻力的作用。这种修改方法可以在整个肽的任何位置灵活修改FITC，而不仅仅是在终端。

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