免疫荧光标记常用的荧光染料有哪些？

本文摘要：荧光标记的单克隆抗体技术是流式细胞仪在研究细胞膜和细胞种功能抗原的研究。肿*基因蛋白等领域扩展了无限的应用空间。荧光探针可以通过蛋白质交联剂共价结合在单克隆抗体上。免疫荧光标记中*常用的染料包括异硫氰···

　　荧光标记的单克隆抗体技术是流式细胞仪在研究细胞膜和细胞种功能抗原的研究。肿*基因蛋白等领域扩展了无限的应用空间。荧光探针可以通过蛋白质交联剂共价结合在单克隆抗体上。免疫荧光标记中*常用的染料包括异硫氰酸荧光素(fluoresceinisocyanate、FITC)、藻红蛋白(PE)和Alexafluor系列染料。

　　异硫氰酸荧光素(FITC)

　　异硫氰酸荧光橙红、异硫氰酸荧光黄、异硫氰酸荧光红、异硫氰酸荧光素异构体I、5-异硫氰酸荧光素。其形状为黄色粉末，具有吸湿性。它是一种生化试剂和医学诊断药物，可以快速诊断地方细菌、病毒和寄生虫引起的疾病。

　　它可以与各种抗体蛋白结合，抗体不会失去与某些抗原结合的特异性，碱性溶液中仍有强绿色荧光，酸沉淀，荧光消失，微溶于丙酮。乙醚和石油醚。

　　特性：黄色粉末。它具有吸湿性。它可以与各种抗体蛋白结合。结合后的抗体不会失去与某些抗原结合的特异性。碱性溶液中仍有强绿色荧光。加酸后沉淀，荧光消失，微溶于丙酮、乙醚和石油醚。

　　用途：本产品是一种生化试剂，也是一种医学诊断药物，主要用于荧光抗体技术中的荧光染料，可与各种抗体蛋白结合，抗体结合不失去与某些抗原结合的特异性，在碱性溶液中具有较强的绿色荧光。用于医学、农业和畜牧业，可以快速诊断地方细菌、病毒和寄生虫引起的疾病。

　　储存条件：4℃干燥避光。

　　FITC纯产品为黄色或橙色晶体粉末，易溶于水和酒精溶剂。异构体有两种，其中异构体类型在效率、稳定性和蛋白质结合方面更好。FITC分子量为389.4，**吸收光波长为490~495nm，**发射光波长为520~530nm，呈现亮黄绿色荧光。FITC可以在寒冷和干燥的地方保存多年，是应用*广泛的荧光素。其主要优点是人们对黄绿色更敏感，通常切片标本中的绿色荧光比红色少。

　　藻红蛋白(PE)

　　藻红蛋白(P-phycoerythrin、PE)是从红藻中分离纯化的，目前广泛使用新型荧光标记试剂。藻胆蛋白能在特定波长的刺激下发出强荧光，其荧光强度是荧光素的30-100倍。具有良好的吸光性能和较高的量子产量，在可见光谱区域具有较宽的刺激和发射范围。

　　采用的标记方法可以很容易地将其与生物素、亲和素和各种单克隆抗体结合成荧光探针，用于免疫检测、荧光显微技术、流细胞荧光测定等临床诊断和生物工程技术。

　　优点:

　　在荧光分析中使用藻胆蛋白具有传统化学荧光染料无法比拟的优势：1.在较宽的PH范围内具有较宽的吸收光谱，更容易选择合适的激发波长，从而获得高效的荧光发射，并在激发时具有特殊的荧光发射峰;

　　2.吸光量和荧光量子产率高，荧光强而稳定，灵敏度高;

　　3.荧光背景小，不易淬灭，荧光保存期长;

　　4.水溶性极佳，易于其他分子交联，非特异性吸附少;

　　5.提取纯天然海洋生物，无毒副作用，无放射性，操作**。

　　容易与抗体、生物素、亲合素、免疫蛋白等物质结合，制成荧光探针。可用于荧光显微检测、荧光免疫测定、双色或多色荧光分析、癌细胞表面抗原检测、蛋白质、核酸等生物大分子分析。用于临床诊断和生物工程技术，如免疫检测、荧光显微技术和流细胞荧光测定。

　　结构：分子结构是通过硫醚键连接的载体蛋白和开链线性延伸的四咯化合物。

　　稳定性：4度可稳定保存1年。不要冷冻。

　　光敏作用:藻红蛋白具有光敏作用，是海洋藻类中重要的捕光色素蛋白之一，也是一种新型的高效光敏剂。单线态氧和其他氧自由基可以在适当波长的光刺激后产生，杀死生物大分子。肿*光动力治疗是在此基础上发展起来的一种有前途的肿*治疗新手段。虽然新型光敏药物不断涌现，包括铝酞菁、C60等。，但目前常用的光敏药物主要来自全血分离的血叶琳衍生物，不仅价格昂贵，而且毒副作用大，皮肤光毒反应严重。接受血叶琳衍生物作为光敏剂的光动力治疗的患者应避光至少两周至一个月，以防止皮肤被光毒性破坏。因此，它限制了肿*光动力治疗的广泛应用。其他光敏药物仍处于讨论阶段。研究表明，藻红蛋白是一种新型高效、无毒、副作用的光敏药物，有望发展成具有实用价值的新型光动力药物。我们动态观察了藻红蛋白和肿*细胞的结合过程，因为藻红蛋白和细胞的结合主要发生在细胞膜、细胞浆和细胞核三个结构层次。PE首先与细胞膜结合，形成明显的环状荧光;随着细胞作用时间的延长，逐渐进入细胞浆和核。有时甚至可以观察到核中清晰的核仁。现有数据表明，PE可以在激光激发后产生单线态氧和其他氧自由基产物。这些活性氧成分可以破坏生物大分子，包括蛋白质和核酸。

　　藻红蛋白激光敏杀伤肿*细胞可能在细胞水平的三个层次上发挥作用：

　　1)藻红蛋白结合肿*细胞膜或游离膜，产物可攻击膜蛋白和不饱和脂质，导致膜蛋白光氧化，损害膜结构;

　　2)位于细胞浆中，光辐射产生的单线态氧等自由基攻击细胞浆中的酶和核酸，影响细胞内的生化反应，破坏RNA的结构。作用于线粒体和生物氧化链;

　　3)作用于细胞核的DNA，阻碍细胞周期，启动细胞凋亡。

公司介绍：

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