外泌体提取和鉴定
本文摘要:外泌体(Exosome)是一种由活细胞分泌,直径在30-150nm,具有双层脂质膜结构的小囊泡,它在机体内存在,外泌体携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中···
外泌体(Exosome)是一种由活细胞分泌,直径在30-150nm,具有双层脂质膜结构的小囊泡,它在机体内存在,外泌体携带有多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等信息,不仅在细胞与细胞间的物质和信息传递中起重要作用
外泌体提取
样本预处理与外泌体分离、保存:
外泌体存在于人类或动物的体液中,我们可以选择不同的样本来源进行相关的外泌体研究。由于外泌体是来源于细胞质膜内陷的含有脂质双分子层膜结构的多泡小体,分布于胞外基质。为了获得高纯度的外泌体,必须确保有效去除所有的细胞碎片及其他不需要的杂质。
外泌体的分离方法通常包括密度梯度离心、差速离心、体积排阻、聚合物沉淀以及试剂盒等方法。
注意事项
1、根据样本的不同,选用不同的外泌体提取方法;
2、避免外泌体中内容物降解好变性,所有操作尽量在4℃条件下进行;
3、避免外泌体膜结构破坏,操作中尽量减少外泌体的压力和剪切力,比如使用钝化的枪头等。
外泌体鉴定
MISEV2018(细胞外囊泡杂志)对外泌体的表征规定了较小试验要求:
① 总体表征:
至少3个阳性(至少包括1个跨膜蛋白和1个细胞溶质蛋白)、1个阴性蛋白质标志物。
② 个体表征:
电镜或原子力显微镜、单颗粒追踪两种方法互为补充。
用途:科研
厂家:西安齐岳生物科技有限公司
公司介绍:
西安齐岳生物科技有限公司是集化学科研和定制与一体的高科技化学公司。业务范围包括化学试剂和产品的研发、生产、销售等。涉及产品为通用试剂的分销、非通用试剂的定制与研发,涵盖生物科技、化学品、中间体和化工材料等领域。
主营产品:COF、MOF单体系列:三蝶烯衍生物、金刚烷衍生物、四苯甲烷衍生物、peg、上转换、石墨烯、光电材料、点击化学、凝集素、载玻片、蛋白质交联剂、脂质体、蛋白、多肽、氨基酸、糖化学等。
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