氯金酸(HAUC14)制备纳米金的方法

本文摘要：西安齐岳生物科技有限公司是一家国内纳米金及其功能试剂制造商，我公司公开提供纳米金的制备方法如下:需要准备的有：氯金酸(HAUC14)是主要的还原材料，常用的还原剂有柠檬酸钠.单宁酸.抗坏血酸.白磷.硼···

　　西安齐岳生物科技有限公司是一家国内纳米金及其功能试剂制造商，我公司公开提供纳米金的制备方法如下:

　　需要准备的有：

　　氯金酸(HAUC14)是主要的还原材料，常用的还原剂有柠檬酸钠.单宁酸.抗坏血酸.白磷.硼氢化钠等。0.8nm~150nm的胶体金可根据还原剂的类型和强度制备。常用的制备方法是柠檬酸盐还原法。

　　操作方法流程：

　　(1)先将HAUC14制成0.01%水溶液，取100ml加热沸腾。

　　(2)搅拌时，准确加入一定量的1%柠檬酸三钠(Na3C6H5O7.2H2O)水溶液。

　　(3)继续加热和煮沸15分钟。此时，可以观察到柠檬酸钠中添加的淡黄色氯金酸水溶液很快变成灰色，然后变成黑色，然后逐渐稳定为红色。整个过程约为2~3分钟。

　　(4)冷却室温后，用蒸馏水恢复原体积。

　　该方法可制备16~147nm粒径的胶体金。金粒的大小取决于制备过程中添加的柠檬酸三钠的量。

　　注意事项：

　　●氯金酸易潮解，应干燥.避光保存。

　　●氯金酸对金属有很强的腐蚀性，因此在制备氯金酸水溶液时，不宜用金属勺称量氯金酸。

　　●用于制备胶体金的蒸馏水应为双蒸馏水或三蒸馏水，或优质去离子水。

　　●制备胶体金的玻璃容器必须清洗干净。使用前应用酸洗，并用蒸馏水冲洗。它是硅化的。硅化方法可用5%二氯甲烷的氯仿溶液浸泡数分钟，用蒸馏水冲洗后干燥备用。

　　●胶体金的鉴定和保存：胶体金的制备并不困难，但制备高质量的胶体金并不容易。因此，应对每次制备的胶体金进行验证。主要检查指标包括颗粒大小、粒径均匀性以及是否有凝结颗粒。

　　肉眼观察是一种基本、简单、方便的验证方法，但需要一定的经验。良好的胶体金应清晰透明。如果制备的胶体金混浊或液体表面有漂浮物，则表明制备的胶体金有更多的凝固颗粒。在阳光下仔细观察和比较胶体金的颜色，并粗略估计金颗粒的大小。当然，也可以使用分光光度计扫描max来估计金颗粒的粒径。制备的胶体金用作电镜观察，并选择一些具有代表性的显微摄影，以更好地测量胶体金的平均粒径。胶体金可长期保存在清洁的玻璃器皿中，并添加少量防腐剂(如0.02%Nan3)。如果保存不当，就会形成细菌生长或凝固颗粒。少量凝固颗粒不会影响未来胶体金的标记。为了提高标记效率，可以先低速离心去除凝固颗粒。

　　1.纳米金在电镜水平上的应用。

　　纳米金应用电镜水平研究早，发展展迅速，应用广泛。其**的优点是可以使用不同大小的颗粒或结合酶标记进行双重或多重标记。直径为3~15nm的胶体金可作为电镜水平的标记。3~15nm的胶体金主要用于单一抗原颗粒的检测，15nm的直径主要用于检测更多的感染细胞。

　　纳米金用于电镜水平的研究，主要包括观察细胞悬液或单层培养中的细胞表面抗原。②检测单层培养中的细胞内抗原。③组织抗原检测。

　　电镜水平采用金标记，主要方法有：包埋前染色、包埋后染色、免疫负染色、双标记技术、原位杂交技术等。

　　实验表明，该方法样本用量少。检测速度快。比较明显。操作简单。敏感性和特异性高，既可用于抗原检测，也可用于抗体检测。因此，它也可学研究和诊断。

　　2.纳米金在光镜水平上的应用。

　　胶体金也可用作光镜水平的标记，取代传统的荧光素.酶等。各种细胞涂片.切片均可应用。主要用于:①用单克洞抗体或抗血清检测细胞悬液或培养的单层细胞的膜表面抗原。②检测培养的单层细胞内抗原，③组织或亚薄切片中抗原。

　　用于光镜水平研究的纳米金可以弥补其他标记物不可避免的本底过高和内部酶活性干扰等缺点。

　　3.纳米金在流式细胞仪中的应用：

　　采用荧光素标记的抗体是免疫学研究中的重要技术之一，通过流细胞计数分析细胞表面抗原。然而，由于不同荧光素的光谱相互重叠，难以区分不同的标记，因此必须为流细胞计数寻找非荧光素标记。这可以同时做几个标记。标记物必须能够改变散射角，纳米金可以显著改变红激光散射角，因此可以作为流细胞计的标记物之一。

　　4.凝结试验：单分散的免疫金溶胶为清澈透明的溶液，其颜色随溶胶颗粒的大小而变化。当与相应抗原或抗体发生*一反应时，溶胶颗粒极度增加，光散射发生变化，颗粒沉降，溶液颜色变淡变无色，这一原理可定性或定量应用于免疫反应。

　　5.免疫印刷技术(immunobloting):免疫印刷是一种新型的免疫化学技术。用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质，将硝酸纤维素膜转移到区带中，然后用酶免疫法(或免疫荧光.RIA)定量。

　　免疫纳米金也可用于该法的定量。硝酸纤维素膜转移后与特定抗体隔热后，与葡萄球菌A蛋白致敏的胶体金温育，彻底清洗多余的胶体金，并根据胶体金颗粒的颜色测量样品中的特定抗原。

　　利用金颗粒催化银离子还原成金属银的原理，利用银显影剂增强金颗粒的可见性，大大提高测量灵敏度。该免疫金银染色方法的应用越来越广泛。

　　由于纳米金免疫印刷技术简单、快速、灵敏度高，在临床免疫诊断中具有很大的应用潜力。

　　6.肉眼水平应用纳米金。

　　纳米金取代了传统的三种标志物，用于肉眼免疫检测。除纳米金本身的特点外，还有以下优点：试剂和样量很小，样品量可低1~2ul;②不需要γ-计数器。荧光显微镜。酶标记检测仪等贵重仪器更适合现场应用;③无放射性同位素、邻苯二胺等有害物质;④实验结果可长期保存;⑤时间大大缩短，检测速度提高。在金标记过程中，无共价键的形成是一定离子浓度下的物理吸附。因此，几乎所有的大分子物质都可以用金标记，大分子物质的活性在标记后不会改变。实验结果表明，胶体金的敏感性可以达到ELISA的水平。结合银染色时，检测的敏感性大大提高。

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西安齐岳生物科技有限公司是集化学科研和定制与一体的高科技化学公司。业务范围包括化学试剂和产品的研发、生产、销售等。涉及产品为通用试剂的分销、非通用试剂的定制与研发，涵盖生物科技、化学品、中间体和化工材料等领域。
主营产品：COF、MOF单体系列：三蝶烯衍生物、金刚烷衍生物、四苯甲烷衍生物、peg、上转换、石墨烯、光电材料、点击化学、凝集素、载玻片、蛋白质交联剂、脂质体、蛋白、多肽、氨基酸、糖化学等。