花氰染料Cy3/Cy5/Cy7磺化与非磺化有哪些差异?
本文摘要:磺化Cy染料是在普通Cy染料的发色团上添加磺酸基团,大大提高了染料的水溶性。磺化的另一个优点是,染料的光学稳定性和量子产率略有提高,因此磺化染料更耐光,荧光稍强。由于磺酸盐的原因,这种染料的水溶性很高···
磺化Cy染料是在普通Cy染料的发色团上添加磺酸基团,大大提高了染料的水溶性。磺化的另一个优点是,染料的光学稳定性和量子产率略有提高,因此磺化染料更耐光,荧光稍强。由于磺酸盐的原因,这种染料的水溶性很高,在标记反应中不需要添加任何有机溶剂。此外,由于水溶性好,标记的染料分子不会聚集,也不会影响标记大分子的稳定性。这一点非常重要,特别是当每个目标生物大分子需要标记多个染料分子时,或者当目标生物大分子溶解度低,稳定性差时。目前,齐岳生物可提供的磺化Cy染料包括sulfo-Cy3、sulfo-Cy3.5、sulfo-Cy5、sulfo-Cy5、sulfo-Cy7和sulfo-Cy7。
Cyanine3是一种橙色荧光花青素荧光染料。它的荧光非常明亮,对pH不敏感。一般可以用530nm-561nm的激光束刺激,然后用TRITC的滤片观察,所以可以用于大多数荧光仪器。标记后,Cy3的背景荧光通常被认为低于TRITC系列,如TAMRA。Cy3可用于标记蛋白质、抗体、肽等。它*常用的用途是标记核酸分子(DNA和RNA)。
Cy5是一种明亮的红色荧光染料。由于其刺激和发射峰在长波长红光区,而该区域生物样品本身的荧光较弱,因此与Cy3相比,Cy5具有明显的灵敏度优势。此外,它的荧光(ex:667nm)在大多数仪器的检测范围内,因此它也是一种非常常见的荧光标记化合物。需要注意的是,对于像Cy5这样的长波长荧光,肉眼不是很敏感,除非强标记样品,否则荧光显微镜一般看不见。
Cy5.5的发射光谱略大于700nm,位于红光/近红外交界面。它也恰好位于**个成像窗口的边缘(invivoimagingwindow1),可用于小动物的成像。此外,由于红外生物样品包括组织的背景荧光非常弱,经常适用于背景荧光禁忌的实验。
Cy7是一种接近红外荧光染料。它的荧光肉眼看不见,但可以被大多数荧光仪器识别。它是一种非常常用的小动物成像染料,常用于标记核酸、蛋白质、肽、纳米粒、聚合物等。由于其发射波长比Cy5.5长,Cy7在小动物成像实验中通常比Cy5.5更敏感,背景较弱。
Cy7.5是一种类似于ICG的近红外荧光染料。它的荧光波长很长,位于**个体内成像窗口invivoimagingwindow1)的前半部分。该区域的荧光染料在体内成像中*敏感。荧光穿透强,背景低,常用于小动物分布跟踪等体内成像实验。
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本文由QiyueLh整理,2022年5月20日.
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